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      產品展示 / products 您的位置:網站首頁 > 產品展示 > 生化試劑盒 > 谷胱甘肽系列 > GSH-2-V還原型谷胱-甘肽(GSH)測試盒

      還原型谷胱-甘肽(GSH)測試盒

      簡要描述:還原型谷胱-甘肽(GSH)測試盒測定意義:
      GSH是細胞內最主要的抗氧化巰基物質,在抗氧化、蛋白質巰基保護和氨基酸跨膜運輸等中具有重要作用。還原型與氧化型比值(GSH/GSSG)是細胞氧化還原狀態的主要動態指標。因此,測定細胞內GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態。

      • 產品型號:GSH-2-V
      • 廠商性質:生產廠家
      • 更新時間:2023-04-25
      • 訪  問  量:493
      詳情介紹

      還原型(reduced glutathione, GSH)試劑盒說明書:

      分光光度法50管/48樣。

      注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

      測定意義:

      GSH是細胞內主要的抗氧化巰基物質,在抗氧化、蛋白質巰基保護和氨基酸跨膜運輸等中具有重要作用。還原型與氧化型比值(GSH/GSSG)是細胞氧化還原狀態的主要動態指標。因此,測定細胞內GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態。

      還原型谷胱-甘肽(GSH)測試盒測定原理:

      DTNB與GSH反應生成復合物,在412nm處有特征吸收峰;其吸光度與GSH含量成正比。

      自備儀器和用品:

      可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。

      試劑組成和配制:

      試劑一:液體60ml×1瓶,4℃保存。

      試劑二:液體42ml×1瓶,4℃保存。

      試劑三:液體12ml×1瓶,4℃避光保存。

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      1.組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。

      2.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

      3.血清等液體:直接測定。

      還原型谷胱-甘肽(GSH)測試盒測定操作:

      1. 分光光度計預熱30min,調節波長到412nm,蒸餾水調零。

      2. 試劑二置于25℃(一般物種)或者37℃(哺乳動物)水浴中保溫30min。

      3. 空白管:取1mL玻璃比色皿,依次加入100μL蒸餾水,700μL試劑二,200μL試劑三,混勻靜置2min后測定412nm吸光度A1。

      4. 測定管:取1mL玻璃比色皿,依次加入100μL上清液,700μL試劑二,200μL試劑三,混勻靜置2min后測定412nm吸光度A2。

      注意:空白管只需要測定一次。

      GSH含量計算公式:

      GSH標準曲線公式:y=1.5 x(x為GSH濃度,μ mol /mL;y為吸光值)

      GSH計算:

      (1)按蛋白濃度計算

      GSH(μ mol/ mg prot)=(A2-A1) ÷1.5×V樣÷(V樣×Cpr )=0.667×(A2-A1) ÷Cpr

      (2)按樣本鮮重計算

      GSH(μ mol/g鮮重)=(A2-A1) ÷1.5×V樣÷(V樣÷V樣總×W)=0.667×(A2-A1) ÷W

      (3)按細胞數量計算

      GSH(μ mol /104 cell)=(A2-A1) ÷1.5×V樣÷(V樣÷V樣總×細胞數量)=0.667×(A2-A1) ÷細胞數量

      (4)按液體體積計算

      GSH(μ mol/ mL)=(A2-A1) ÷1.5×V樣÷V樣 =0.667×(A2-A1)

      V樣總:上清液總體積,1 mL;V樣:加入反應體系中上清液體積,100μL=0.1mL;W:樣品質量,g ;Cpr:上清液蛋白質濃度,mg/mL。

      注意事項:

      1.試劑一中含有蛋白質沉淀劑,因此上清液不能用于蛋白濃度測定。

      2.低檢出限為0.01mmol/L。





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