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      堿性磷酸酶(AKP/ALP)測試盒

      簡要描述:注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
      測定意義:
      AKP/ALP是一種含鋅的糖蛋白酶,在堿性環境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP廣泛分布于人體各臟器中,以肝臟為主。

      測定原理:
      在堿性環境中,AKP/ALP催化磷酸苯二鈉生成游離酚;酚與4-氨基安替林和鐵化鉀反應紅色亞醌衍生物,在510nm有特

      • 產品型號:AKP-2-V
      • 廠商性質:生產廠家
      • 更新時間:2023-03-29
      • 訪  問  量:441
      詳情介紹

      堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP/ALP)活性測定試劑盒

      說明書

                                                        分光光度法50管/24樣

      注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

      測定意義:                          

      AKP/ALP是一種含鋅的糖蛋白酶,在堿性環境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP廣泛分布于人體各臟器中,以肝臟為主。


      測定原理:

      在堿性環境中,AKP/ALP催化磷酸苯二鈉生成游離酚;酚與4-氨基安替/比林和鐵化鉀反應紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測定510 nm吸光度增加速率,來計算AKP活性。


      自備儀器和用品:

      可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。


      試劑組成和配制:

      試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

      試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。

      試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。

      試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍綠色之前均可使用。

      標準品:液體×1支(EP管中),2 μ mol/mL酚標準液,4℃保存。


      粗酶液提?。?/span>

      1.組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,4℃、8000g離心10min,取上清液待測。

      2.細菌或細胞:按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

      3.血液可直接測定,或者適當稀釋后測定。


      測定步驟:

      1. 分光光度計預熱30min,調節波長到510 nm,蒸餾水調零。

      2. 試劑三置于37℃水浴中預熱30 min。

      3. 空白管:取EP管,加入20μL蒸餾水,200μL試劑二,200μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四600μL,混勻后于510 nm測定吸光度,記為A空白管。

      4. 標準管:取EP管,加入20μL標準品,200μL試劑二,200μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四600μL,混勻后于510 nm測定吸光度,記為A標準管。

      5.對照管:取EP管,加入20μL上清液,200μL蒸餾水,200μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四600μL,混勻后于510 nm測定吸光度,記為A測定管。

      6. 測定管:取EP管,加入20μL上清液,200μL試劑二,200μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四600μL,混勻后于510 nm測定吸光度,記為A測定管。

      注意:空白管和標準管只需測定一次。每個測定管設一個對照管。








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