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      γ-谷氨酰半胱氨-酸連接酶(GCL)測試盒

      簡要描述:谷氨酰胺(Gln)是 GSH 合成的限速酶,GSH 對 GCL 有反饋抑制作用。GCL 基因表達受多種因素調節,如氧化劑、抗氧化劑、生長因子和炎癥因子等。

      • 產品型號:GCL-1-M
      • 廠商性質:生產廠家
      • 更新時間:2023-11-21
      • 訪  問  量:474
      詳情介紹

      γ-谷氨酰半胱氨-酸連接酶(GCL)測試盒

      微量法 100T/96S 

      注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。 

      測定意義: 

      GCL 是 GSH 合成的限速酶,GSH 對 GCL 有反饋抑制作用。GCL 基因表達受多種因素調節,如氧化劑、抗氧化劑、生長因子和炎癥因子等。GCL 活性高低對 GSH 含量和 GSH/GSSG比值有重要影響。 

      測定原理: 

      在 ATP 和 Mg2+存在下,GCL 催化谷氨-酸和半胱氨-酸合成γ-谷氨酰半胱氨-酸;同時 ATP 去磷酸化產生無機磷分子,通過測定無機磷增加速率,即可計算出 GCL 活性。 

      自備儀器和用品: 

      冷凍離心機、水浴鍋、移液器、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、濃硫酸和蒸餾水。 

      試劑組成和配制: 

      試劑一:液體 105mL×1 瓶,4℃保存。 

      試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加 6 mL 蒸餾水充分震蕩溶解。 

      試劑三:粉劑×1 管,4℃保存。臨用前加入蒸餾水 1.5 mL 充分震蕩溶解。 

      試劑四:液體 7mL×1 瓶,室溫保存。 

      試劑五:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 12 mL 蒸餾水,充分震蕩溶解后,緩緩加入 400µL濃硫酸(自備),邊加邊攪拌。 

      粗酶液提?。?nbsp;

      1. 組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

      2. 細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入 1mL 試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7秒,總時間 3min);然后 8000g,4℃,離心 10min,取上清置于冰上待測。

      3. 血清等液體:直接測定。γ-谷氨酰半胱氨-酸連接酶(GCL)測試盒

         

       

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